奥林巴斯显微镜按此法制备的胶体金直径为5nm。增加单宁酸与柠檬酸钠的体积比，得到的胶体金直径可进一步减小;反之，奥林巴斯显微镜则能使其直径增大。

奥林巴斯显微镜不论用何法制备胶体金时都应注意以下各点:(a)偏光显微镜所有溶液均应用双蒸水配制;(b)柠檬酸钠与单宁酸溶液应现用现配;(c)用于制备胶体金的烧瓶必须硅化。奥林巴斯显微镜硅化方法:偏光显微镜在清洁干燥的烧瓶中加人少许I%硅油(用甲苯溶解)，奥林巴斯显微镜轻轻转动烧瓶，显微镜价格使硅油均匀铺展于烧瓶内壁，偏光显微镜倾出多余硅油.烧并置烤箱内烘干.上述步骤可重复2-3次。

偏光显微镜蛋白质可吸附于胶体金表面，成为蛋白质一胶体金复合物，奥林巴斯显微镜用于免疫电镜标记或亲和标记。大的蛋白质分子可直接吸附于胶体金表面.分子量较小的肤类应事先与非特异蛋白(如BSA)偶连后才能吸附到胶体金表面。奥林巴斯偏光显微镜用于制备复合物的蛋白质应不含或只含极少的电解质.奥林巴斯偏光显微镜蛋白质能否牢固地吸附在胶体金上与pH值有关。研究表明，当pH值高于蛋白质等电点。.1-0.2时，偏光显微镜所形成的蛋白质一胶体金复合物。这个pH值称为pH。偏光显微镜几种常用蛋白质的pH值见表6-1。奥林巴斯显微镜当制备蛋白质一胶体金复合物时，奥林巴斯显微镜应预先将胶体金的pH值调节到该蛋白质的pH。可用0.2mol/L KZCO:或0.1mol/L HCI调节胶体金的pH值。偏光显微镜应使用pH计测定胶体金的pH值.为保护pH计的电极，奥林巴斯显微镜在测试杯中加入胶体金前，应先加入2^-3滴1 %PEG(聚乙二醉，分子量20,000)，并在加入胶体金后轻轻混匀。d.除第10管外，每管加入0. lml 10% NaCI，奥林巴斯显微镜于1-2分钟后观察颜色是否发生变化.如第n管胶体金颜色由红转变为紫色，偏光显微镜则第n-1管的蛋白量就是稳定。.5m1胶体金所需的最少蛋白童，奥林巴斯显微镜在其基础上增加10%作为蛋白1.

其它蛋白质(如植物凝集素, BSA-肤复合物、Avidin等)与偏光显微镜胶体金复合物的制备可参照以上两法。奥林巴斯显微镜得到的蛋白质一胶体金复合物中加入。.1%一。.01%的叠氮钠。在4℃下可保存至少半年。

铁蛋白是使用的一种免疫电镜标记物。其分子全为750kD。分子中心为一由经化铁磷酸盐构成的核心，奥林巴斯显微镜含有大量(2000个以上)铁原子，因而可在电镜下看到。铁芯的直径约6nm o周围为蛋白质(脱铁铁蛋白)外壳。偏光显微镜整个分子直径约12nm。蛋白质外壳可通过化学或免疫学方法与其它分子，如抗体偶连.与胶体金相比，奥林巴斯显微镜铁蛋白作为免疫电镜标记物的主要缺点是电子密度较低，偏光显微镜在电镜下不如胶体金清晰;分子大小一定，不能作双标记;与树脂，包括低温包埋树脂的非特异结合过高等。其优点是，标记效率比胶体金高;控制条件可在铁蛋白与I步分子间形成l=1的结合，奥林巴斯显微镜使定量分析更为简单。目前，奥林巴斯显微镜铁蛋白主要在包埋前法和冰冻超薄切片上的包埋后法中使用。

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