由于高分辨扫描电镜的问世，为用表面标记技术观察细胞表面形态和区别两类细胞群与其表面形态相联系的机能提供了条件.用此技术方法可研究细胞表面杭原、受体的性质，分布及运动.在原则上，透射电镜与荧光显微镜用的免疫标记技术也适用于免疫扫描电子显微术。但由于扫描电镜与透射电镜的成像原理不同，因此对免疫扫描电镜术的标记物有些特殊要求。这些要求是:

1.清晰、容易识别的形状:对透射电镜的标记物要求电子致密度高。电动显微镜的标记物电子密度不是重要间题，而形状是识别的重要因素。

2.大小适宜:一般而言，扫描电镜分辨率低于透射电镜，此外扫描电镜标本要金属镀膜，这都影响样品表面结构的分辨。因此标记物若太小、结构过于徽细，就不能与样品表面固有结构区别。但标记物过于大，又不能明确定出表面抗原位置，因此奥林巴斯显微镜的标记物大小要兼顾以上两方面。

3.化学性质稳定。生物显微镜在标本处理过程中不会被损坏.此外在样品制备过程中能牢固地结合。

4.对细胞表面的固有亲合力差。

符合以上条件的较常用的表面标记物有人工合成的非生物材料(胶乳顺粒，硅酸聚合物等)，生物大分子(铁蛋白，血蓝蛋白等)，病毒(TMV),噬菌体和胶体金顺粒等。

胶乳颖粒有聚苯乙烯和丙烯两种。聚苯乙烯类籁粒表面疏水，易发生自聚集。但与抗体以适当比例混合时，不需偶联便能很好地与抗体附着.丙烯类颗粒表面有OH基，自发聚集少.标记时可利用OH基进行偶联。

尼康显微镜所观察样品硅酸聚合物颖粒为球形。使用时先加入7-氨基三乙氧基丙硅烷{Y-amino-triethoxy propylsilane)使顺粒表面带一NH,，然后再与抗体偶联。

TMV长300nm,宽16nm‘细长杆状结构。扫描电镜下识别性好.能与】茄牢固地结合，形成TMV-IgG复合物。如果红细胞表面附有正常免IgG,TMV便能使这种红细胞布满杆状物。由于该病毒过长使分辨率下降，也有实验室将其截短使用。

常用的咙菌体是T,噬菌体(以大肠杆菌为宿主)有头有尾，形如端抖。在扫描电镜下识别性能好.但体积较大，<DX174也是以大肠杆菌为宿主的噬菌体，呈二十面体.因为体积较小，孺用高倍观察.

如果应用电动显微镜，金标记是理想的。铁蛋白虽然有高电子密度，但分子毕竟太小，因而应用有限。

关于抗体的纯化与透射电镜所用的有关方法相同。抗体与标记物的偶联也不在此赘述。本文来源