奥林巴斯显微镜激光共聚焦双扫描系统
激光共聚焦显微镜在生命科学领域应用非常广泛,现在多数的科研领域要求在刺激样品的同时需要看到样品的瞬间变化,这就需要在另外引入一个扫描头来完成实验,奥林巴斯显微镜这就对激光共聚焦设备提出了又一个OLYMPUS 研究级显微镜BX51 和数码冷CCD DP70 的明场及荧光观察Media Cybernetics 的Image-Pro Plus 功能*的科学图像分析软件OLYMPUS FLUOVIEWTM 系列 新一代光谱型激光共聚焦系统 FV1000更高的技术要求,例如OLYMPUS FV1000共聚焦设备新引进的双扫描系统就为生物学研究又增加新的手段(同步双扫系统—— SIM Scanner ,当一束激光对样品进行刺激的同时,另一束激光同时采集到高分辨率的成像),除了XY扫描振镜外,另外引入一个扫描头,新的扫描头与XY 振镜各自独立工作,只进行光刺激功能,这样就解决了以往用AOTF 或ZOOM方式进行光刺激工作时必须在取图和刺激间频繁切换的问题,提高了刺激效率,节省了操作时间。奥林巴斯显微镜的优点是可以在刺激标本的同时,不影响正常的图象获取,可以在刺激的同时看到标本的瞬间变化,为FLIP/FREP/FRET/ 光转化(Photoactivation,如/KEADA 蛋白)/PAGFP/解龙锁Uncaging等光刺激研究实验提供理想的实验平台.
例如:双扫描系统的应用范围:解笼锁Uncaging:利用笼锁化合物 (如: caged ATP,caged glutamate)。
特性:UV 激发可以活化被笼锁的化合物 (如:ATP, glutamate )。
FRAP(荧光漂白后恢复) :FRAP是研究蛋白动力学的重要工具。在FRAP 实验中,利用激光脉冲有针对性的对被荧光蛋白标记的细胞内的一个小区域快速,不可逆的漂白。该漂白区域没有荧光信号.然后使用显微镜测量荧光信号随时间的恢复情况。荧光的恢复是由未漂白的分子流入被漂白区域所造成的。因此荧光信号恢复的动力学过程含有了被标记蛋白的表现迁移信息。
FRET(荧光共振能量转移):应用1 分子内结构变化(蛋白质、DNA构象等);2 分子间相互作用(酶活力、离子通道结构变化等);3 离子浓度测量(通过构建FRET 蛋白测量Ca2+, PH, cAMP 等);4 分子间作用距离测量;5荧光的效率与距离成6次幂关系,可以灵敏测量1-10nm 内的距离变化。
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