普通光学显微镜的使用-显微镜的放大原理
细胞是生物体的墓本结构和功能单位,细胞的大小差别很大,有的用肉眼就能看到,鸵鸟卵黄直径可达5cm,最小的支原体仅有0.15m。一般而言,真核细胞的体积要大于原核细胞,高等动物的卵细胞大于体细胞,这是因为卵细胞含有许多供胚胎发育使用的营养物质-卵黄,而使细胞的体积增长了许多倍。对于大多数生物的细胞来说,其体积一般在20-30um。之间,大多必需借助于光学显微镜或电子显微镜才能被观察到。细胞大多体积微小,计量单位一般用微米(micron, 5m)和纳米(nanometer, nm)等。
光学显微镜(light microscope)是生物科学和医学研究领域常用的仪器,它在细胞生物学、组织学、病理学、微生物学及其他有关学科的教学研究工作中有着极为广泛的用途,是研究人体及其他生物机体组织和细胞结构强有力的工具。
光学显微镜简称光镜,是利用光线照明使微小物体形成放大影像的仪器。目前使用的光镜种类繁多,外形和结构差别较大,有些类型的光镜有其特殊的用途,如暗视野显微镜、荧光显微镜、相差显微镜,倒置显微镜等,但其基本的构造和工作原理是相似的。一台普通光镜主要由机械系统和光学系统两部分构成,而光学系统则主要包括光源、反光镜、聚光器、物镜和目镜等部件。
光镜是如何使微小物体放大的呢?物镜和目镜的结构虽然比较复杂,但它们的作用都是相当于一个凸透镜,由于被检标本是放在物镜下方的1--2倍焦距之间的,上方形成一倒立的放大实相,该实相正好位于目镜的下焦点(焦平面)之内,目镜进一步将它放大成一个虚像,通过调焦可使虚像落在眼睛的明视距离处,在视网膜上形成一个直立的实像。显微镜中被放大的倒立虚像与视网膜上直立的实像是相吻合的,该虚像看起来好像在离眼睛25cm处。
分辨力是光镜的主要性能指示。所谓分辨力((resolving power)也称为辨率或分辨本领,是指显微镜或人眼在25cm的明视距离处,能清楚地分辨被检物体细微结构最小间隔的能力,即分辨出标本上相互接近的两点间的最小距离的能力。据测定,人眼的分辨力约为1005m。显微镜的分辨力由物镜的分辨力决定,物镜的分辨力就是显微镜的分辨力.而目镜与显微镜的分辨力无关。放大率或放大倍数是光镜性能的另一重要参数,一台显微镜的总放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积。
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